印跡法(blotting)又稱轉(zhuǎn)移電泳,是一種將待分離物質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相支持物(如硝酸纖維素膜或PVDF膜等)上,經(jīng)過與相應(yīng)探針作用的一種新方法。1975年,Southern創(chuàng)造了將DNA區(qū)帶原位轉(zhuǎn)移到硝酸基纖維素膜(NC膜)上,再進(jìn)行雜交的方法,被稱為Southe...[繼續(xù)閱讀]

    毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)又稱高效毛細(xì)管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一類以毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力的新型液相分離技術(shù)。毛細(xì)管電泳實際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)...[繼續(xù)閱讀]

    瓊脂糖凝膠電泳(agraose gel electrophoresis,AGE)是用瓊脂糖作為支持物的一種電泳方法,主要用于研究核酸等生物大分子物質(zhì)。一、原理利用瓊脂糖電泳分離和分析核酸的基本原理是電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)(分離小分子物質(zhì)時無此效應(yīng))。當(dāng)...[繼續(xù)閱讀]

    利用光作用于物質(zhì)后所產(chǎn)生的發(fā)射光、吸收光、散射光等光譜學(xué)特性能夠?qū)ξ镔|(zhì)進(jìn)行定性、定量的分析,這一技術(shù)常被稱為光學(xué)光譜分析法。隨著光學(xué)、數(shù)學(xué)、電子學(xué)、計算機(jī)軟硬件技術(shù)的發(fā)展,該方法越來越多地被應(yīng)用于化學(xué)、生物...[繼續(xù)閱讀]

    可見光的波長范圍是從360nm(紫色)到760nm(紅色),范圍在200～360nm的光是近紫外光,研究物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)吸收光譜的分析方法稱為紫外-可見光吸收光譜法(ultraviolet and visible absorption spectrometry),也稱為紫外-可見光光度法(ultraviolet and ...[繼續(xù)閱讀]

    一、熒光的產(chǎn)生如前所述,物質(zhì)吸收光量子能量后被激發(fā),從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),處于激發(fā)態(tài)的分子不穩(wěn)定,可通過多種途徑釋放多余的能量返回基態(tài),發(fā)射熒光是其中的一種途徑。物質(zhì)從激發(fā)態(tài)的最低振動能級回到基態(tài)時所發(fā)射出的光稱...[繼續(xù)閱讀]

    DNA重組技術(shù)是在分子水平對基因進(jìn)行體外操作,因而也稱為分子克隆(molecular cloning)或基因克隆。所謂克隆是指通過無性繁殖過程所產(chǎn)生的與親代完全相同的子代群體;而分子克隆是指在體外對DNA分子按照既定的目的和方案進(jìn)行人工重...[繼續(xù)閱讀]

    常見的分子克隆中所需的基因片段制備方法包括通過基因組文庫分離、篩選基因,cDNA文庫分離、篩選基因,人工合成基因和應(yīng)用PCR獲取目的基因等。一、通過基因組文庫分離、篩選基因基因組文庫(genomic library)是指用基因克隆的方法保...[繼續(xù)閱讀]

    所謂載體(vector)是指能在連接酶作用下和外源DNA片段或基因連接,并運(yùn)送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。目前用于分子克隆的載體種類繁多,包括在大腸桿菌中使用的質(zhì)粒(pBR322、pUC18/pUC19)、噬菌體載體(λ噬菌體、M13)、酵母人工染色體...[繼續(xù)閱讀]

    DNA分子的體外重組是DNA分子之間的連接過程。這是一個DNA連接酶催化的生物化學(xué)反應(yīng),目前幾種常用的DNA分子連接方法有:1. 黏性末端連接法(cohesive end ligation)這種方法適用于插入片段和載體分子具有相同的黏性末端(cohesive end),相同的...[繼續(xù)閱讀]