層析是用于蛋白質分離純化的重要技術手段。它是基于固定相(層析介質)對流動相(蛋白質溶液)中各組分阻滯能力大小不同而實現(xiàn)對各組分的分離。按照蛋白質的理化性質不同而實現(xiàn)分離的層析包括:(1) 根據(jù)蛋白質所帶電荷不同而分...[繼續(xù)閱讀]

    為了研究某一特定蛋白的功能,或是利用該特定蛋白研究其他基因的功能,需要將該蛋白在體外表達出來。將該蛋白的編碼DNA 序列擴增出來,然后應用酶學的辦法將該目的片段和表達載體DNA 片段連接,組裝成一個新的DNA 分子,再用適當?shù)?..[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質的定性分析是指確定樣本中是否有蛋白質存在,以及存在的是何種蛋白質。蛋白質定量分析是確定樣本中總蛋白含量或某一單一蛋白含量。蛋白質是由許多氨基酸通過肽鍵連接構成的生物大分子,氨基酸、肽鍵、蛋白質的組成特...[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質相互作用及通過相互作用而形成的蛋白質復合物是細胞行使各種基本功能的主要承擔者,幾乎所有重要的生命活動,包括DNA 復制與轉錄、蛋白質合成與分泌、信號轉導和代謝等都離不開蛋白之間的相互作用。常用的蛋白質相互...[繼續(xù)閱讀]

    激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscopy ,CLSM)是20世紀80年代中期在顯微分光光度計和流式細胞儀的基礎上發(fā)展起來的一種以光學為基礎,融機械、電子、計算機為一體的高精度現(xiàn)代化新型顯微測試儀器,它脫離了傳統(tǒng)光學顯...[繼續(xù)閱讀]

    基因是遺傳信息的載體,而生命活動、表觀形狀的體現(xiàn)等是由基因的編碼產(chǎn)物——蛋白質所執(zhí)行。越來越多的證據(jù)表明,基因表達和蛋白質豐度及蛋白質功能之間的相關性不完全一致,為了在一個樣本中平行檢測多種蛋白表達及功能信...[繼續(xù)閱讀]

    DNA 重組質粒是分子克隆的一類,而分子克隆和聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction ,PCR)是兩種廣泛用于復制特定DNA 序列的方法。DNA 重組系在體外將外源目的基因插入載體DNA ,載體一般來源于質?；虿《?重組形成一個具有自我復制能力...[繼續(xù)閱讀]

    基因轉錄是指以DNA 的一條鏈為模板,按照堿基互補配對的原則,在RNA 聚合酶復合物的作用下合成RNA 的過程,是基因表達過程中的重要環(huán)節(jié)(彩圖4-2-1) ?；虻霓D錄水平受到機體精細的調控,過程復雜,涉及多個生物學過程。機體重要生物...[繼續(xù)閱讀]

    人類基因組計劃的完成和人類單倍型計劃的實施,使得人類基因組中以單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism ,SNP)為主的多種分子遺傳標記不斷地被發(fā)現(xiàn)報道。隨著分子生物學和分子遺傳學檢測技術日新月異的發(fā)展,近年來的研究發(fā)...[繼續(xù)閱讀]

    RNA 干擾(RNA interfering ,RNAi)是指由與靶基因序列同源的雙鏈RNA (doublestranded RNA ,dsRNA)引發(fā)的廣泛存在于生物體內的序列特異性基因轉錄后的沉默過程。其通過細胞中的核糖核酸酶Ⅲ 家族成員之一的dsRNA 特異性核酸酶Dicer 將dsRNA 裂解成由...[繼續(xù)閱讀]