阿特拉津高靈敏酶聯(lián)免疫吸附檢測法的建立

摘要： 目的:建立高靈敏度的阿特拉津酶聯(lián)免疫吸附檢測法。方法:將間接競爭ELISA進行條件優(yōu)化以提高檢測靈敏度,包括包被抗原與一抗的最佳工作濃度篩選、選擇一抗的最佳稀釋度對包被抗原進行細化篩選、不同有機溶劑對競爭結(jié)合反應的影響、酶標二抗稀釋度篩選等。用建立的酶聯(lián)免疫檢測法檢測實際樣品,再與高效液相色譜法(HPLC)檢測進行比較。結(jié)果:利用優(yōu)化后條件建立了阿特拉津間接競爭ELISA檢測曲線,標準曲線的相關(guān)系數(shù)R2=0.9958,相關(guān)性較好。另由此標準曲線可得LOD(最低檢出限)為1.972ng/ml。用于檢測實際樣品,回收率在80%-120%之間。當添加樣品濃度為(0~6)ng/ml時,該法的檢測靈敏度高于HPLC。結(jié)論:新建立的阿特拉津ELISA特異性好、精密度高,可代替大型儀器用于阿特拉津?qū)嶋H樣品檢測。 ... （共6頁）