阿特拉津致PC12細胞損傷機制的研究

摘要： 目的通過體外實驗,探討阿特拉津(atrazine,ATR)對多巴胺能神經(jīng)元的的毒性作用及損傷的分子機制。方法在體外培養(yǎng)PC12細胞,加入不同濃度ATR染毒,在12和24h收獲細胞和培養(yǎng)液,通過高效液相色譜熒光法(HPLC-FL)測定多巴胺(Dopamine,DA)濃度,通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(real-timePCR)和蛋白質(zhì)印跡法(Western-blot)檢測ATR對PC12細胞酪氨酸羥化酶(tyrosinehydroxylase,TH)、核受體相關(guān)因子1(nuclearreceptor-relatedfactor1,Nurr1)、巴胺轉(zhuǎn)運體(dopaminetransporter,DAT)和囊泡單胺轉(zhuǎn)運體2(vesicularmonoaminetransporter2,VMAT2)基因表達的影響與蛋白表達量的變化,并用SPSS17.0進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果HPLC-FL顯示隨著ATR染毒劑量的增加,細胞DA含量呈劑量依賴性降低(P<0.05),并隨時間增長減少。Real-timePCR結(jié)果顯示,用100、200和400μmol/L濃度的ATR染毒12與24h的PC12細胞,與對照組比較差異顯著(P<0.05),存在劑量-反應(yīng)關(guān)系,呈負相關(guān)性。PC12細胞中Nurr1、DAT、VMAT2、TH蛋白顯著降低(P<0.05)。結(jié)論ATR通過影響巴胺代謝途徑中的相關(guān)酶及其調(diào)控酶形成的基因致PC12細胞多巴胺能損傷。 ... （共5頁）